Fluoresceina izotiocyjanian CAS 27072-45-3

Isotiocyjanian fluoresceinyPomarańczowy czerwony, izotiocyjanian fluorescencyjny żółty, izotiocyjanian fluorescencyjny czerwony, izomer fluoresceiny izotiocyjanianowej I, 5- izotiocyjanian fluoresceina. Żółty proszek. Jest higroskopowy. Może wiązać się z różnymi białkami przeciwciał, a przeciwciało po wiązaniu nie traci specyficzności wiązania z pewnym antygenem. Nadal ma silną zieloną fluorescencję w roztworze alkalicznym. Po dodaniu kwasu wytrąca się, a fluorescencja znika. Jest nieco rozpuszczalny w eterze acetonu, eterze i naftowym. Jest to biochemiczny odczynnik, a także medyczny lek diagnostyczny, który może szybko zdiagnozować choroby spowodowane przez bakterie, wirusy, pasożyty itp. Ponadto może wiązać się z różnymi białkami przeciwciał, a przeciwciało po wiązaniu nie tracą specyficzności wiązania z pewnym antygenem, a nadal istnieje silna zielona fluorescencja w rozwiązaniu alkalicznym. Po dodaniu kwasu wytrąca się, a fluorescencja znika i jest lekko rozpuszczalna w acetonie, eterze i eterze naftowym.

Badanie właściwościIsotiocyjanian fluoresceinyOznaczona insulina dla aminowanej żelatyny i jej zastosowanie w nosowej administracji błony śluzowej:

Pod warunkiem braku zewnętrznego emulgatora wodny roztwór aminiętej żelatyny rozproszono w oliwy z oliwek, a nowy rodzaj dodatnio naładowanych mikrosfer żelowych, mikrosfery aminiętej żelatyny, przygotowano poprzez procesy emulgowania, żelowania, dehydracji i sieciowania. Średnia wielkość cząstek mikrosfer wynosi 40-50 μm. Rozmiar jest równomiernie rozłożony. Suszone mikrosfery mogą pochłaniać około 20 razy własnego ciężaru wody, tworząc hydrożele. Aminowane mikrosfery żelatynowe mają wyższą zawartość amino niż mikrosfery żelatynowe. Są one dodatnio naładowane w roztworze buforu wody destylowanej i fosforanowej, a potencjał ZATA w wodzie destylowanej wynosi 41,5 mV.

Wraz ze wzrostem stężenia glutaraldehydu lub wydłużeniem czasu reakcji sieciowania, zawartość aminowa w mikrosferach zmniejszyła się. Jednak niezależnie od warunków reakcji sieciowania, aminowane mikrosfery żelatynowe przygotowane przez tę metodę mają wyższą pierwotną zawartość amino niż mikrosfery żelatynowe. Amininowane mikrosfery żelatynowe można szybko degradować (<1h) in the presence of trypsin, but slowly (>20H) w pożywce pepsyny i kwasowej. Interakcja między mikrosferami żelatyny i mucyny jest silniejsza niż między mikrosferami żelatyny. Wysoka gęstość dodatniej ładunku aminowanych mikrosfer żelatyny jest głównym powodem silnej interakcji z mucyną. Bioadhezyjne właściwości aminowanych mikrosfer żelatynowych badano metodą znakowania fluorescencji i technologii degradacji enzymów in vitro, przy użyciu izolowanego modelu mycia perfuzji żołądka szczura oraz eksperymentu in vivo u szczurów.

Wyniki wykazały, że w tych samych warunkach eksperymentalnych liczba amowanych mikrosfer żelatynowych zatrzymanych w izolowanym żołądku szczura była większa niż w przypadku mikrosfer żelatyny, a rodzaj roztworu nawadniającego (sztuczny sok żołądka lub bufor fosforanu pH7) nie miała znaczącego wpływu na retencję żołądka z mikrosfery, a elektrostatyczne interakcje i mikrosfory gastryczne) nie było znaczącego wpływu decydującego decydującego decydującego w denezy gastronomicznej). Współczynnik zatrzymania żołądka mikrosfer w tym modelu. Jednak w eksperymencie stwierdzono, że ilość amowanych mikrosfer żelatyny zatrzymanych w izolowanym żołądku szczura zmniejszyła się wraz ze wzrostem stężenia środka sieciującego glutaraldehyd podczas przygotowywania mikrosfery, co wskazywało, że stopień aminosu na powierzchni mikrosfery lub stopień pomiaru śluzówki.

Eksperymentalne wyniki in vivo u szczurów wykazały, że mikrosfery żelatyny aminowej miały lepszą adhezję błony śluzowej niż mikrosfery żelatynowe. Wpływ aminowanej żelatyny na wchłanianie nosa glukanu i insuliny badano u zdrowych szczurów. Wyniki wykazały, że 0. 2% (wn) żelatyna aminowa może znacznie sprzyjać wchłanianiu glukanu izotiocyjanatowego fluoresceiny z błony śluzowej nosa szczura z biodostępnością 23,8%. Po podaniu donosowym 10 buforu fosforanu insulinowego IU zawierającego 0 2% (w/v) żelatyny aminowej poziom glukozy we krwi był znacznie niższy niż w buforze fosforanowym insulinowym.

Isotiocyjanian fluoresceiny(FITC), jako klasyczny odczynnik znakowania fluorescencyjnego, stał się niezbędnym narzędziem w dziedzinach biologii, medycyny i materiałów materiałowych ze względu na wysoką wydajność kwantową, doskonałą fotostabilność i dobrą biokompatybilność.

Markery biomolekularne: precyzyjne śledzenie od białek do kwasów nukleinowych

 

Grupa izotiocyjanianowa (- n=c=s) FITC może ulegać kowalencyjnym reakcjom z grupami aktywnymi, takimi jak grupy aminowe i tiolowe w biomolekułach, tworząc stabilne kompleksy znakowania fluorescencyjnego. Ta cecha sprawia, że jest to preferowany odczynnik do znakowania białka, kwasu nukleinowego i peptydu.
Znakowanie białek i badania funkcjonalne
FITC osiąga specyficzne znakowanie poprzez wiązanie z resztami lizyny białek, takich jak przeciwciała i lektyny. Na przykład w eksperymentach immunofluorescencyjnych przeciwciała znakowane FITC mogą wiązać się z antygenami powierzchniowymi komórkami i ilościowo analizować poziomy ekspresji antygenu za pomocą mikroskopii fluorescencyjnej lub cytometrii przepływowej. Dane eksperymentalne pokazują, że intensywność fluorescencji koniugatu FITC IgG jest liniowo związana ze stężeniem antygenu, a czułość wykrywania może osiągnąć poziom Danaka. Ponadto białka znakowane FITC można również stosować do badań interakcji białek, takich jak analiza zmian konformacyjnych białka poprzez technologię transferu energii rezonansu fluorescencyjnego (FRET).

 

Znakowanie kwasu nukleinowego i hybrydyzacja molekularna
FITC może być chemicznie modyfikowane w celu oznaczenia końca kwasów nukleinowych 5 'lub 3' do technologii hybrydyzacji fluorescencji in situ (FISH). W badaniach nad rakiem sondy oznaczone przez FITC mogą szczególnie wiązać się z chromosomalnymi nieprawidłowymi obszarami, aby pomóc w rozpoznaniu chorób hematologicznych, takich jak białaczka i chłoniak. Na przykład sondy FITC ukierunkowane na geny fuzyjne BCR-ABL mogą wyświetlać żółte sygnały fluorescencyjne w jądrach komórkowych międzyfazowych z szybkością dokładności wynoszącą ponad 95%.
Znakowanie peptydu i dostarczanie leku
Peptydy oznaczone przez FITC odgrywają ważną rolę w systemach dostarczania leków. Przykładając M2PEP-FITC, cząsteczka ta składa się z ukierunkowanego peptydu M2PEP i grupy fluorescencyjnej FITC, która może wyraźnie rozpoznać receptory na powierzchni komórek nowotworowych i osiągnąć ukierunkowane dostarczanie leku. Eksperymenty wykazały, że akumulacja liposomów znakowanych M2PEP-FITC w tkankach nowotworowych wynosi 3,2 razy większe niż wolne leki, znacznie poprawiając skuteczność terapeutyczną i zmniejszając działania niepożądane.

Diagnoza medyczna: od wykrywania patogenów do wczesnego badania nowotworów

 

Właściwości fluorescencyjne FITC sprawiają, że jest to „złoty standard” w dziedzinie diagnostyki in vitro, szeroko stosowanej w technikach takich jak immunochromatografia, cytometria przepływowa i ELISA.
Szybkie wykrywanie patogenów
Przeciwciała znakowane FITC mogą być stosowane do szybkiej diagnozy zakażeń bakteryjnych, wirusowych i pasożytniczych. Na przykład w diagnozie malarii przeciwciała przeciw malarii znakowane FITC wiążą się z rozmazem krwi pacjenta, a zielony sygnał fluorescencji pasożyta obserwuje się za pomocą mikroskopii fluorescencyjnej. Czas wykrywania jest skrócony z 2 godzin w tradycyjnych metodach do 15 minut, a czułość osiąga 98%. Ponadto, sondy nukleinowe znakowane FITC można również stosować do wykrywania kwasów nukleinowych wirusa oddechowego, takich jak gen ORF1AB SARS-COV -2, ze swoistością 99,2%.

 

Markery guza
W cytometrii przepływowej,Isotiocyjanian fuoresceinyZnakowane przeciwciała anty-CD45 mogą odróżniać komórki białaczkowe od normalnych komórek krwi. Dane pokazują, że dodatnia szybkość znakowanego FITC przeciwciała CD34 w diagnozie ostrej białaczki szpikowej (AML) wynosi 85%, czyli o 20% wyższe niż tradycyjne badanie morfologiczne. Jeśli chodzi o wczesne badanie nowotworów, technologia wykrywania krążących komórek nowotworowych FITC (CTC) może wychwytywać komórki nowotworowe w bardzo niskim stężeniu we krwi obwodowej, zapewniając nową metodę wczesnej diagnozy guzów stałych, takich jak rak piersi i rak płuc.
Diagnoza chorób autoimmunologicznych
W technologii ELISA do diagnozowania chorób, takich jak toczeń rumieniający (SLE) można zastosować autoantyjskie FITC (takie jak przeciwciała przeciw jądrowym i przeciwwęzione przeciwciała DNA)). Eksperymenty wykazały, że FITC-ELISA ma wrażliwość 92% i swoistość 95% do wykrywania przeciwciał anty SM, co jest znacznie lepsze niż tradycyjne metody immunofluorescencji.

Badania biologii komórkowej: od struktury subkomórkowej po dynamiczne śledzenie

 

Przepuszczalność komórek i niska toksyczność FITC sprawiają, że jest to idealne narzędzie do obrazowania komórkowego, szeroko stosowanego w lokalizacji organelli, obserwacji podziału komórek i badań apoptozy.
Znakowanie organelli komórkowej i obserwacja dynamiczna
Sondy mitochondrialne oznaczone przez FITC (takie jak mitotracker Green) mogą szczególnie wiązać się z potencjałem błony mitochondrialnej i monitorować mitochondrialne zmiany morfologiczne w czasie rzeczywistym. W badaniach neuronalnych przeciwciała białkowe oznaczone FITC mogą wykazywać dynamiczne rozszerzenie stożków wzrostu aksonów, ujawniając mechanizm rozwoju neuronowego. Ponadto do badania procesów autofagii, oznaczone przez FITC sondy lizosomowe (Lysotracker Green), co kwantyfikując liczbę autofagosomów poprzez zmiany intensywności fluorescencji.

 

Analiza cyklu komórkowego i apoptozy
W cytometrii przepływowej jodek propidium znakowany FITC (PI) może wiązać się z DNA i rozróżniać różne stadia cyklu komórkowego (G 0/g1, s, g2/m) przez intensywność fluorescencji. Dane eksperymentalne pokazują, że czułość metody podwójnego barwienia FITC-PI do wykrywania apoptozy komórek wynosi 98%, czyli o 30% wyższe niż tradycyjna metoda barwienia niebieskiego trypanu. Ponadto sondy aneksyny V FITC mogą szczególnie wiązać się z fosfatydyloseryną odsłoniętą na powierzchni komórek apoptotycznych, osiągając precyzyjną identyfikację wczesnych komórek apoptotycznych.
Badania nad migracją i inwazją komórek
W eksperymentach Transwell komórki znakowane FITC mogą monitorować proces migracji w czasie rzeczywistym. Na przykład w badaniu przerzutów do guza szybkość migracji komórek raka piersi znakowanych FITC (MCF -7) przez klej macierzy jest pozytywnie skorelowany ze zdolnością inwazji, zapewniając ilościowe wskaźniki do badania leków przeciwnowotworowych.

Rozwój leku: od walidacji docelowej do oceny skuteczności

 

FITC odgrywa wiele ról w opracowywaniu leków, w tym walidację docelową, ocenę systemu dostarczania leków i badania farmakokinetyczne.
Docelowe walidację i mechanizm badań akcji
Do weryfikacji celów leków można zastosować znakowane FITC inhibitory małych cząsteczek. Na przykład inhibitory EGFR znakowane FITC (takie jak gefitynib) mogą wykazać wiązanie leków z receptorami EGFR na powierzchni komórek nowotworowych, kwantyfikując kwantyfikację powinowactwa wiązania (wartość KD) poprzez intensywność fluorescencji. Ponadto siRNA oznaczone przez FITC można również wykorzystać do badania wydajności wyciszania genów, stanowiąc podstawę do terapii interferencyjnej RNA.

Ocena systemu dostarczania leków
Nanocząstki oznaczone przez FITC (takie jak liposomy i mikrosfery polimerowe) mogą monitorować zachowanie dystrybucji i uwalniania leków in vivo w czasie rzeczywistym.

 

Eksperymenty wykazały, że akumulacja liposomów znakowanych FITC w tkankach nowotworowych wynosi 2,8 razy większe niż wolne leki, a sygnał fluorescencyjny może trwać 24 godziny, dostarczając danych wizualnych do optymalizacji systemów dostarczania leków.

Badania farmakokinetyczne i toksykologiczne
Cząsteczki leku oznaczone przez FITC można analizować ilościowo pod kątem ich procesów wchłaniania, dystrybucji, metabolizmu i wydalania (ADME) poprzez technologię obrazowania fluorescencyjnego. Na przykład intensywność fluorescencji antybiotyków znakowanych FITC (takich jak wankomycyna) w nerkach jest liniowo powiązana ze stężeniem leku, co stanowi podstawę do optymalizacji dawkowania leku. Ponadto testy cytotoksyczności oznaczone przez FITC mogą również ocenić uszkodzenie leków na normalne komórki i prowadzić oceny bezpieczeństwa.

Nauka materiałowa: od czujników po sondy fluorescencyjne

 

Charakterystyka odpowiedzi fluorescencyjnej FITC sprawia, że jest ona wyjątkowa mającą zastosowanie w dziedzinie nauki materiałowej, w tym rozwój czujników pH, czujników temperatury i sond jonowych.
Responsywny czujnik fluorescencji
Intensywność fluorescencjiIsotiocyjanian fluoresceiny is significantly affected by the pH value of the solution. In weakly acidic environments (pH 5.0-6.5), protonation of FITC groups leads to increased fluorescence intensity; Under alkaline conditions (pH>8. 0), fluorescencja jest wygaszona. W oparciu o tę charakterystykę, zmodyfikowane przez FITC nanocząstki można zastosować do monitorowania fluktuacji wewnątrzkomórkowej kwasowo-zasadowej. Na przykład intensywność fluorescencji kompleksu biliribiny FITC w mikrośrodowisku nowotworów wynosi 2,3 razy więcej niż normalna tkanka, zapewniając nową metodę diagnozy nowotworu.

 

Responsywna temperatura sonda fluorescencyjna
Życie fluorescencji FITC zmienia się wraz z temperaturą. W warunkach niskiej temperatury (4 stopnie) żywotność fluorescencji mikrosfer polimerowych znakowanych FITC jest rozszerzona do 5,2 nanosekund, czyli 1,8 razy wyższa niż temperatura pokojowa (25 stopni). Ta cecha sprawia, że jest to idealne narzędzie do badania procesów przejścia fazowego i kriokonserwacji komórkowej.
Sonda wykrywania jonów metali
FITC znacznie zmniejsza intensywność fluorescencji w połączeniu z jonami metali, takimi jak Cu ² ⁺ i Hg ² ⁺, dzięki czemu nadaje się do monitorowania środowiska. Na przykład nanocząstki żelu krzemionkowego zmodyfikowanego FITC mają limit wykrywania 0.

Rolnictwo i zwierzęta gospodarskie: od wykrywania patogenów po poprawę różnorodności

 

Zastosowanie FITC w polu rolnym stopniowo się rozwija, w tym wykrywanie wirusów roślin, diagnozę chorób zwierząt i identyfikację czystości różnorodności.
Szybkie wykrywanie wirusów roślinnych
Przeciwciała wirusowe znakowane FITC mogą być stosowane do wykrywania wirusa mozaikowego tytoniu (TMV), wirusa mozaiki ogórka (CMV) i innych wirusów. Eksperymenty wykazały, że czułość FITC-ELISA do wykrywania TMV jest 0. 1 ng/ml, co jest 10 razy wyższe niż tradycyjne metody serologiczne. Ponadto sondy oznaczone kwasem nukleinowym znakowanym FITC można również stosować do wykrywania genów egzogennych w uprawach zmodyfikowanych genetycznie, takich jak geny BT odporne na owady.

Diagnoza chorób zwierząt
Przeciwciała znakowane FITC można zastosować do wykrywania wirusa gorączki świń (CSFV), wirusa grypy ptasiej (AIV) i innych wirusów.

 

W rozpoznaniu gorączki świń, przeciwciała przeciw CSFV znakowane FITC wiążą się z skrawkami tkankami i obserwują rozkład wirusa za pomocą mikroskopii fluorescencyjnej, skracając czas wykrywania z tradycyjnych metod 3 do 6 godzin. Ponadto cytometria przepływowa znakowana FITC może być również stosowana do wykrywania komórek T specyficznych dla patogenów we krwi zwierzęta i oceny intensywności odpowiedzi immunologicznej.
Identyfikacja czystości różnorodności
Do identyfikacji czystości odmian upraw można zastosować oznaczone przez FITC sondy DNA. Na przykład sonda FITC ukierunkowana na gen odporności na chorobę ryżu Pi TA może dokładnie rozróżnić homozygoty i heterozygot w hybrydowych nasionach ryżu, z dokładnością identyfikacji czystości 99,5%. Ponadto markery molekularne SSR znakowane FITC mogą być również stosowane do analizy różnorodności genetycznej ras zwierząt gospodarskich i drobiu, zapewniając naukowe podstawy hodowli.

Synteza FITC: 4- bezwodnik nitoftaliczny (patrz C8H3NO5, [5466-84-2]) reaguje z resorcynolą w 195-200 CO. Roztwór etanolu wodorotlenku sodu, 4 „Otrzymuje się nitofluoresceinę. Następnie 4 ' - nitrofluoresceina rozpuszczana jest w wodzie amoniaku, reagowana z rexhlet niklu i hydrat hydrazyny w temperaturze pokojowej przez 2 godziny i zmniejszony do fluoresceiny 4' - fluoresceiny aminowej. Najbardziej radykalne jest acylowane i wyeliminowane do uzyskania i eliminowane do acysylowania i wyeliminowane do Acylowanego i wyeliminowanego do Acylowanego i wyeliminowanegoIsotiocyjanian fluoresceiny.

FITC Pure Product to żółty lub pomarańczowy proszek krystaliczny, który jest łatwo rozpuszczalny w rozpuszczalniku wody i alkoholu. Istnieją dwa izomery, wśród których izomer typu I jest lepszy pod względem wydajności, stabilności i wiązania białka. Masa cząsteczkowa FITC wynosi 389,4, maksymalna długość fali absorpcji wynosi 490 ~ 495 nm, a maksymalna długość fali emisji wynosi 520 ~ 530 nm, co wykazuje jasnożółtą zieloną fluorescencję. FITC można przechowywać przez wiele lat w zimnych, ciemnych i suchych miejscach i jest najczęściej stosowaną fluoresceiną. Jego główną zaletą jest to, że ludzkie oko jest bardziej wrażliwe na żółtą zieleń, a zielona fluorescencja w próbce sekcji jest zwykle mniejsza niż czerwona.

Popularne Tagi: Fluoresceina izotiocyjanian CAS 27072-45-3, dostawcy, producenci, fabryka, hurtowa, kupna, cena, masa, na sprzedaż