Błękit tiazolilowy CAS 298-93-1

Shaanxi BLOOM Tech Co., Ltd. jest jednym z najbardziej doświadczonych producentów i dostawców błękitu tiazolilowego cas 298-93-1 w Chinach. Zapraszamy do sprzedaży hurtowej wysokiej jakości błękitu tiazolilowego cas 298-93-1 na sprzedaż tutaj z naszej fabryki. Dostępna jest dobra obsługa i rozsądna cena.

Błękit tiazolilowy, lepiej znany jako MTT (bromek 3-(4,5-dimetylotiazol-2-ilo)-2,5-difenylotetrazoliowy), kryje w sobie fascynującą dwoistość – jest zarówno niezbędnym narzędziem w biologii komórki, jak i kameleonową osobliwością chemiczną. Ten żółty krystaliczny proszek przechodzi w żywych komórkach zaskakującą metamorfozę: reduktazy mitochondrialne rozcinają jego pierścień tetrazolowy, przekształcając go w nierozpuszczalny fioletowy osad formazanu – reakcja tak uderzająca wizualnie, że stała się złotym standardem pomiaru żywotności komórek. Jednak poza stołem laboratoryjnym MTT ujawnia bardziej ezoteryczne zachowania; jego krystaliczna struktura tworzy pod mikroskopem osobliwe wzory w kształcie jodełki, a właściwości redoks pozwalają mu uczestniczyć w egzotycznych reakcjach fotochemicznych pod wpływem światła o określonej długości fali. Co ciekawe, związek ten wykazuje rzadkie zjawisko zwane „metachromazją” – pojawienie się różnych kolorów w zależności od stężenia i środowiska molekularnego – właściwość, którą niegdyś wykorzystywali chemicy zajmujący się tekstyliami do tworzenia „inteligentnych” barwników. Niedawne badania ujawniły jego nieoczekiwaną rolę jako słabego inhibitora niektórych enzymów łańcucha oddechowego, co sugeruje, że ten wszechobecny odczynnik testowy mógł subtelnie wpływać na te same procesy metaboliczne, które naukowcy go badają. Po rozpuszczeniu w rozpuszczalnikach organicznych roztwory MTT wykazują niezwykły efekt wygaszenia fluorescencji, który zaintrygował fizykochemików, sugerując, że złożone interakcje międzycząsteczkowe wciąż oczekują na pełne wyjaśnienie.

Błękit tiazolilowy,Nazwa chemiczna to bromek 3-(4,5-dimetylo-2-tiazolo)-2,5-difenylotetrazoliowy, w skrócie MTT, który jest ważnym związkiem organicznym. Odkąd Mosman po raz pierwszy doniósł o zastosowaniu barwienia MTT do określenia wzrostu i przeżycia komórek w 1983 r., MTT jest szeroko stosowane w takich dziedzinach, jak nauki przyrodnicze, badania medyczne i opracowywanie leków. Poniżej znajduje się szczegółowe wyjaśnienie jego przeznaczenia:

Zastosowanie w badaniach biologii komórki

 

MTT jest jedną z klasycznych metod określania proliferacji komórek. Podczas hodowli komórkowej dehydrogenazy, takie jak dehydrogenaza bursztynianowa, w mitochondriach żywych komórek, mogą zredukować egzogenny MTT do nierozpuszczalnego niebieskofioletowego krystalicznego formazanu, który osadza się w komórce. Martwym komórkom brakuje tej zdolności redukującej i dlatego nie wytwarzają formazanu. Rozpuszczając formazan w komórkach i mierząc jego wartość absorpcji światła przy określonych długościach fal (takich jak 490 nm lub 562 nm) za pomocą czytnika enzymatycznego-testu immunoabsorpcyjnego (ELISA), można pośrednio uwzględnić liczbę żywych komórek. W pewnym zakresie liczby komórek ilość utworzonych kryształów MTT jest proporcjonalna do liczby komórek, zatem proliferację komórek można określić na podstawie zmierzonej wartości absorbancji (wartości OD).

Zastosowanie w badaniach biologii komórki

 

MTT można również wykorzystać do określenia toksyczności leków lub innych metod leczenia (takich jak napromieniowanie) na hodowanych komórkach in vitro. Porównując wartości OD grupy leczonej i grupy kontrolnej, można ocenić wpływ leków lub metod leczenia na aktywność komórek. Im większa wartość OD, tym silniejsza aktywność komórki; Wręcz przeciwnie, wskazuje, że im słabsza aktywność komórki lub większa toksyczność komórkowa. Metoda ta ma szerokie zastosowanie w badaniach przesiewowych leków, badaniach toksykologicznych i innych dziedzinach. Chociaż MTT służy głównie do pomiaru proliferacji komórek i cytotoksyczności, w niektórych przypadkach można go również wykorzystać do pomocy w badaniu apoptozy komórek. Podczas procesu apoptozy komórek zmienia się aktywność enzymów wewnątrz komórki, co może wpływać na zdolność redukcyjną MTT. Porównując różnicę wartości OD pomiędzy komórkami apoptotycznymi i komórkami prawidłowymi, można wstępnie określić występowanie apoptozy komórek. Należy jednak zauważyć, że MTT nie jest wyspecjalizowaną metodą wykrywania apoptozy komórek, a jej wyniki wymagają wszechstronnej analizy w połączeniu z innymi metodami wykrywania apoptozy.

Zastosowanie w opracowywaniu leków

 

W procesie opracowywania leków powszechnie stosowaną-wysoką wydajnością metodą przesiewową leków jest test MTT. Inkubując jednocześnie badany lek z komórkami i stosując test MTT do pomiaru zmian w aktywności komórek, można szybko przeszukać potencjalne aktywne cząsteczki leku. Metoda ta ma zalety łatwej obsługi, wiarygodnych wyników i dużej wydajności, a także ma ważną wartość aplikacyjną na wczesnym etapie opracowywania leku. Test MTT można również wykorzystać do badania mechanizmu działania leków. Porównując zmiany aktywności komórek w różnych warunkach leczenia lekami, można wstępnie określić wpływ leków na procesy takie jak proliferacja komórek i apoptoza. Łącząc inne techniki biologii molekularnej, takie jak Western blot i cytometria przepływowa, można dokładniej poznać cele i szlaki sygnałowe leków. W ocenie bezpieczeństwa leku test MTT można zastosować do oceny toksycznego działania leków na komórki. Mierząc zmiany wartości OD komórek po leczeniu lekiem, można określić, czy lek ma cytotoksyczność i siłę toksyczności. Ma to ogromne znaczenie dla kierowania badaniami przedklinicznymi i klinicznym zastosowaniem leków.

Zastosowanie MTT w innych dziedzinach

 

W badaniach immunologicznych test MTT można zastosować do określenia zdolności limfocytów do proliferacji. Inkubując limfocyty z antygenami lub środkami immunostymulującymi i mierząc zmiany w aktywności komórek za pomocą testu MTT, można ocenić zdolność limfocytów do odpowiedzi immunologicznej. Metoda ta ma szerokie zastosowanie w opracowywaniu szczepionek, immunoterapii i innych dziedzinach. W badaniach onkologicznych test MTT można zastosować do określenia aktywności proliferacyjnej i wrażliwości komórek nowotworowych na lek. Porównując zmiany wartości OD komórek nowotworowych w różnych warunkach leczenia lekami, można zbadać przesiewowo cząsteczki leku o działaniu hamującym na komórki nowotworowe i ocenić ich-działanie przeciwnowotworowe. Ma to ogromne znaczenie w kierowaniu klinicznym leczeniem nowotworów. W badaniach toksykologii środowiskowej test MTT można zastosować do oceny toksycznego wpływu substancji zanieczyszczających środowisko na komórki. Inkubując komórki z różnymi stężeniami substancji zanieczyszczających i mierząc zmiany aktywności komórek za pomocą testu MTT, można określić toksyczność i mechanizm działania substancji zanieczyszczających. Ma to ogromne znaczenie dla oceny ryzyka ekologicznego substancji zanieczyszczających środowisko i formułowania polityki ochrony środowiska. 

Eksperymentalne etapybłękit tiazolilowymetoda:

1: Trypsyna trawi komórki w fazie logarytmicznej, wiruje i zbiera je po zakończeniu w celu sporządzenia zawiesiny komórek i reguluje jej stężenie do 5-10 na podstawie liczby komórek × 104/ml. Dla początkujących konieczne jest, aby komórki osiągnęły poziom 5-10 × 104/ml, często nie wiedzą od czego zacząć. Jestem tutaj, aby przedstawić prostą metodę wstępnego określenia liczby komórek.

Weźmy na przykład 25 cm2 powszechnie używane do hodowli komórkowych:

1) Gęstość komórek wynosi około 80% ~ 90% (rysunek poniżej pokazuje przybliżony stan komórek przy gęstości 80% ~ 90%). Po trawieniu i odwirowaniu usunąć supernatant i dodać 3 ml pożywki w celu wymieszania.

2) Weź nową sterylną probówkę wirówkową o pojemności 15 ml (do następnego etapu inokulacji płytki 96-dołkowej) i napełnij ją około 9 ml pożywki

3) Z 3 ml zawiesiny komórek przygotowanej w pierwszym kroku należy pobrać 1 ml, dodać do górnej probówki i po wymieszaniu policzyć komórki. W tym momencie jest to zazwyczaj 5-10 lub mniej × 104/ml, co odpowiada 5-10 komórkom na komórkę w 4 komórkach tablicy do liczenia komórek (patrz rysunek poniżej); Jeżeli stężenie nie jest wystarczające, dodaje się zawiesinę komórek zgodnie z wynikiem zliczania i każdą kroplę oblicza się na 50 ul.

4) Liczbę komórek należy dostosować do różnych celów eksperymentu. Na przykład w ogólnym eksperymencie z proliferacją komórek można zastosować 2000 komórek na dołek (co odpowiada gęstości zawiesiny komórek 2 x 104/ml), 5000 do 10000 komórek na dołek (co odpowiada gęstości zawiesiny komórek 5 x 104/ml). Ponadto liczbę komórek należy również określić na podstawie ich własnych cech, takich jak szybkość wzrostu. Na przykład gęstość komórek rosnących szybciej może być nieco mniejsza.

2. Po przygotowaniu zawiesiny komórek należy ją delikatnie wymieszać i dodać po 100ul do każdego otworu, tak aby gęstość testowanych komórek wynosiła 5000-10000/dołek (otwór na krawędzi wypełniony jest sterylnym PBS).

L Uwaga: Ponieważ komórki będą nadal osiadać po wymieszaniu, konieczne jest wielokrotne mieszanie podczas procesu inokulacji, na przykład co sześć dołków, aby zapewnić dokładnie taką samą gęstość komórek w inokulacji pomiędzy otworami, co ma kluczowe znaczenie dla wyników MTT.

3. Włożyć zaszczepioną płytkę do hodowli komórkowej do inkubatora w celu hodowli, aż monowarstwa komórek pokryje dno otworu (płaska płytka z 96 otworami) i dodać lek z gradientem stężeń. Zasadniczo lek można dodać po przyklejeniu ogniwa do ściany, po dwóch godzinach lub pół dnia, ale często lek dodajemy po południu poprzedniego dnia i następnego dnia rano. Generalnie ustawia się 5-7 gradientów, 100ul na otwór i 3-5 wielokrotnych otworów. Zaleca się ustawienie 6, w przeciwnym razie trudno będzie odzwierciedlić rzeczywistą sytuację. Poniższy rysunek może służyć jako punkt odniesienia dla płyty z 96 otworami.

L W celu dawkowania niektórzy ludzie bezpośrednio dodają leki do płytek 96-dołkowych w różnych objętościach, aby utworzyć gradient stężeń. Myślę jednak, że powinniśmy spróbować wymieszać leki o różnym stężeniu w probówce EP, następnie usunąć supernatant hodowli z 96-dołkowej płytki (który można odessać pistoletem wyładowczym) i dodać 100 ul pożywki hodowlanej zawierającej leki o różnym stężeniu, co może zapewnić dokładność stężenia leku. Dodatkowo należy zaznaczyć, że w przypadku zastosowania tej metody nie należy wysysać całego roztworu do hodowli na płytkach 96-dołkowych przed dodaniem leku. Próbkę należy dodawać natychmiast po wyssaniu jej części, aby uniknąć śmierci komórek w wyniku wyschnięcia płytki 96-dołkowej.

Inkubować z 4,5% CO2 w temperaturze 37 stopni przez 16-48 godzin i obserwować działanie leku pod odwróconym mikroskopem. Poniższy rysunek przedstawia typowy gradient cytotoksyczności leku.

4. Dodaj 10 ul roztworu MTT (5 mg/ml, tj. . 0.5% MTT) do każdej studzienki i kontynuuj hodowlę przez 4 godziny. Jeśli lek może reagować zbłękit tiazolilowyroztwór hodowli można wyrzucić po odwirowaniu, a roztwór hodowli zawierający MTT można dodać po 2-3 krotnym przemyciu PBS.

5. Zatrzymaj hodowlę i przygotuj się do rozpuszczenia i krystalizacji.

Błękit tiazolilowy, którego chińska nazwa to błękit metylowy, jest ważnym związkiem organicznym szeroko stosowanym w medycynie, biologii i chemii. w medycynie często stosuje się go w leczeniu zatruć azotynami, zatruciami cyjankami itp., a także stosuje się go w diagnostyce i leczeniu uzupełniającym niektórych chorób; w badaniach biologicznych może być stosowany jako środek barwiący do znakowania komórek lub tkanek. Jednakże, podobnie jak wiele leków, błękit metylenowy może również powodować szereg skutków ubocznych podczas stosowania:

Skutki uboczne ze strony układu pokarmowego

Nudności i wymioty są jednymi z częstych skutków ubocznych błękitu metylenowego ze strony układu pokarmowego. Gdy błękit metylenowy dostanie się do organizmu, może pobudzać błonę śluzową przewodu pokarmowego, powodując nudności, a w ciężkich przypadkach nawet wymioty. Objaw ten jest bardziej wyraźny, gdy prędkość wstrzyknięcia dożylnego jest zbyt duża lub dawka jest zbyt duża. Na przykład w niektórych przypadkach klinicznych pacjenci mogą odczuwać znaczne nudności i wymioty wkrótce po szybkim dożylnym wstrzyknięciu błękitu metylenowego, co wpływa na ich komfort i doświadczenie leczenia. Niektórzy pacjenci po zastosowaniu błękitu metylenowego mogą odczuwać ból brzucha, a stopień bólu może się różnić w zależności od różnic indywidualnych i wahać się od łagodnego dyskomfortu do silniejszego bólu.

Jednocześnie może jej towarzyszyć biegunka, która może wynikać z oddziaływania błękitu metylenowego na perystaltykę jelit i pracę układu trawiennego, co może prowadzić do nieprawidłowej perystaltyki jelit i zmian w wydzielaniu soku trawiennego. Długotrwałe lub częste występowanie bólów brzucha i biegunki nie tylko wpływa na wchłanianie składników odżywczych i zdrowie fizyczne pacjenta, ale może również prowadzić do innych powikłań.

Skutki uboczne układu moczowego

Po zastosowaniu błękitu metylenowego kolor moczu zmieni się na niebieski, co jest spowodowane wydalaniem błękitu metylenowego i jego metabolitów do moczu przez nerki. Ogólnie rzecz biorąc, ta zmiana koloru moczu jest tymczasowa i nie będzie miała poważnego wpływu na zdrowie fizyczne. Jednak w niektórych szczególnych przypadkach, np. u pacjentów z chorobami układu moczowego, zmiany koloru moczu mogą zakłócać rozpoznanie choroby, a lekarze muszą przeprowadzić kompleksową analizę w oparciu o inne wskaźniki badawcze. Podczas oddawania moczu niektórzy pacjenci mogą odczuwać pieczenie w miejscu ujścia cewki moczowej.

 

Może to wynikać ze stymulującego działania błękitu metylenowego na błonę śluzową cewki moczowej, zwłaszcza przy dużym stężeniu moczu lub pocieraniu błony śluzowej cewki moczowej podczas oddawania moczu, uczucie pieczenia będzie bardziej wyraźne. Objaw ten może powodować pewien dyskomfort u pacjentów i wpływać na ich codzienne życie.

Neurologiczne skutki uboczne

Zawroty głowy i ból głowy są częstymi neurologicznymi skutkami ubocznymi błękitu metylenowego. Po zastosowaniu błękitu metylenowego pacjenci mogą odczuwać zawroty głowy i dezorientację lub dyskomfort, taki jak obrzęk i ból głowy. Objaw ten może wpływać na koncentrację uwagi i zdolność myślenia pacjenta oraz zmniejszać efektywność pracy i życia. Występowanie zawrotów głowy i bólu głowy może być związane z wpływem błękitu metylenowego na naczynia krwionośne i nerwy mózgu, a specyficzny mechanizm nadal wymaga dalszych badań. W rzadkich przypadkach błękit metylenowy może powodować zaburzenia świadomości, takie jak senność, śpiączka itp.

Dzieje się tak zazwyczaj na skutek nadmiernego stosowania błękitu metylenowego lub nadwrażliwości pacjentów na lek, co powoduje poważne zahamowanie centralnego układu nerwowego. Zaburzenia świadomości są poważnym skutkiem ubocznym, mogącym zagrozić bezpieczeństwu życia pacjenta i wymagać natychmiastowego leczenia doraźnego.

1. Jakie jest zastosowanie bromku błękitu tiazolilowego i tetrazoliowego?

Błękit tiazolilowy Błękit tetrazolowy (MTT) można stosować do pomiaru proliferacji komórek. MTT tworzy żółtawy roztwór, który jest przekształcany w ciemnoniebieski,-nierozpuszczalny w wodzie formazan MTT przez mitochondrialne dehydrogenazy żywych komórek.

2. Czy przechowywanie błękitu tiazolilowego jest bezpieczne?

Warunki temperaturowe: Proszek szczelnie zamknąć i przechowywać w lodówce w temperaturze -20 stopni w celu konserwacji w stanie zamrożenia, co może skutecznie przedłużyć okres przydatności do spożycia (zwykle 1–2 lata); w przypadku krótkotrwałego przechowywania (w ciągu 1 miesiąca) można go tymczasowo przechowywać w warunkach chłodniczych o temperaturze 4 stopni.

Światło{0}}odporne na wilgoć-Wymagania: proszek MTT jest-wrażliwy na światło i należy go przechowywać w brązowych butelkach z odczynnikami lub przezroczystych butelkach owiniętych folią aluminiową. W międzyczasie należy dodać środki suszące (np. żel krzemionkowy), aby zapobiec wchłanianiu wilgoci i zbrylaniu się proszku.

3. Czy zmieni się kolor błękitu tiazolilowego?

Jeśli w roztworze wytrąci się niebieskofioletowy osad lub ciemnieje, oznacza to, że został utleniony i nie można go dalej używać.
Unikaj umieszczania roztworu w temperaturze pokojowej lub w jasnym otoczeniu, ponieważ może szybko zawieść.

Popularne Tagi: błękit tiazolilowy cas 298-93-1, dostawcy, producenci, fabryki, hurtownia, zakup, cena, luzem, na sprzedaż