Shaanxi BLOOM Tech Co., Ltd. jest jednym z najbardziej doświadczonych producentów i dostawców hydratu ninhydryny cas 485-47-2 w Chinach. Zapraszamy do sprzedaży hurtowej wysokiej jakości hydratu ninhydryny cas 485-47-2 na sprzedaż tutaj z naszej fabryki. Dostępna jest dobra obsługa i rozsądna cena.
Hydrat ninhydrynyto związek organiczny o wzorze cząsteczkowym C9H6O4, CAS 485-47-2 i masie cząsteczkowej 178,141. Jest to prawie biały krystaliczny lub jasnożółty krystaliczny proszek, słabo rozpuszczalny w eterze i chloroformie, a powyżej 100 stopni zmienia kolor na czerwony. Łatwo rozpuszczalny w wodzie, rozpuszczalny w etanolu, słabo rozpuszczalny w eterze i chloroformie. Może być stosowany jako sonda kolorymetryczna do ilościowej analizy aminokwasów i białek. Można go stosować do monitorowania usuwania grupy zabezpieczającej w syntezie peptydów w fazie stałej (test Kaisera). Łańcuch peptydowy jest połączony ze stałą matrycą poprzez C-koniec, a N-koniec służy do wydłużania łańcucha peptydowego.
|
Wzór chemiczny |
C9H6O4 |
|
Dokładna masa |
178 |
|
Masa cząsteczkowa |
178 |
|
m/z |
178 (100.0%), 179 (9.7%) |
|
Analiza elementarna |
C, 60.68; H, 3.40; O, 35.92 |
|
|
|
Gdy N-koniec jest odbezpieczony, test ninhydrynowy wykazuje kolor niebieski. Reszty aminokwasowe są połączone z łańcuchem peptydowym, będąc jednocześnie zabezpieczone na końcu N-. Dlatego też, jeśli następna reszta aminokwasowa zostanie pomyślnie połączona z łańcuchem peptydowym, test ninhydrynowy da wynik bezbarwny lub żółty.
Hydrat ninhydryny, znany również jako hydrat dihydroindeno-1,2,3-trionu, o wzorze cząsteczkowym C9H6O4, jest krystalicznym proszkiem o barwie białej do bladożółtej o unikalnej strukturze trikarbonylowej. Wysoce elektrofilowy centralny atom węgla w cząsteczce czyni go głównym odczynnikiem do wykrywania związków zawierających grupy aminowe, szeroko stosowanym w takich dziedzinach, jak biochemia, kryminalistyka, diagnostyka kliniczna, nauki rolnicze i analiza materiałów.
Mechanizm reakcji chemicznej i charakterystyka rozwoju koloru indenonu
Reakcja barwna indenonu opiera się na jego specyficznej reakcji ze związkami zawierającymi grupy alfa-aminowe. W warunkach słabo kwaśnych (pH 4-6) indanon ulega trzyetapowej reakcji z alfa aminokwasami:
Reakcja kondensacji: kondensacja odwodnienia grupy aminowej - z indanonem z wytworzeniem zasady Schiffa;
Izomeryzacja dekarboksylacyjna: Zasada Schiffa ulega dekarboksylacji i izomeryzacji do iminy, uwalniając jedną cząsteczkę CO₂;
Redukcja utleniania i rozwój zabarwienia: Imina dalej reaguje z ketonem indenowym, tworząc ciemnoniebieski do fioletowego kompleks fioletu Ruhemanna, o maksymalnej długości fali absorpcji 570 nm.
Przypadek szczególny: Prolina i hydroksyprolina mają różne ścieżki reakcji ze względu na obecność pierścieni pirolidynowych, w wyniku czego powstają żółte produkty; Kwas asparaginowy reaguje, tworząc brązową substancję. Ta selektywność sprawia, że keton indenowy jest ważnym narzędziem do analizy struktury aminokwasów.
Zastosowania w biochemii i diagnostyce klinicznej
1. Analiza ilościowa aminokwasów i białek
Keton indenowy jest podstawowym odczynnikiem barwiącym w analizatorach aminokwasów. Po rozdzieleniu chromatograficznym indenon reaguje z aminokwasami, tworząc barwny kompleks, który określa się ilościowo kolorymetrycznie przy długości fali 570 nm, stosując spektrofotometrię. Na przykład:
Badania żywności: Oznacz zawartość lizyny w mleku i oceń wartość odżywczą białka;
Rozpoznanie kliniczne: Wykrycie nieprawidłowego metabolizmu aminokwasów w moczu (np. fenyloketonurii);
Opracowywanie leków: Analizuj czystość leków peptydowych, aby zapewnić spójność partii.
Zalety techniczne: Wysoka czułość (granica wykrywalności w zakresie molowym Dana), szeroki zakres liniowy (0,1-100 μmol/L), odpowiednia do analizy złożonych matryc.
2. Monitorowanie syntezy peptydów w fazie stałej (SPPS).
W syntezie peptydów na fazie stałej-indenon jest monitorowany w czasie rzeczywistym-pod kątem etapów odbezpieczania za pomocą testów Kaisera. Wykrywanie odbezpieczania:
Po usunięciu N-końcowej grupy zabezpieczającej (takiej jak Fmoc) łańcucha peptydowego, reakcja pomiędzy wolną grupą aminową a indenonem pojawia się na niebiesko, co wskazuje na zakończenie reakcji;
Ocena skuteczności sprzęgania: Jeśli następny aminokwas zostanie pomyślnie sprzęgnięty, N--końcowa grupa aminowa zostanie zabezpieczona, a test indanonowy okaże się bezbarwny lub żółty, można odpowiednio zoptymalizować warunki syntezy.
Przypadek: Podczas syntezy angiotensyny II (Asp Arg Val Tyr Ile His Pro Phe) testy Kaisera potwierdziły, że skuteczność sprzęgania na każdym etapie była większa niż 99%, a czystość produktu końcowego osiągnęła 98,5%.
3. Analiza produktów hydrolizy białek
Keton indenu może wykryć wolne aminokwasy w hydrolizacie białka i pomóc w badaniu mechanizmów hydrolizy enzymatycznej. Na przykład:
Enzymatyczna hydroliza kazeiny przez proteazę żołądkową: Ocenić ilościowo uwalnianie fenyloalaniny i leucyny, stosując metodę kolorymetryczną z ninhydryną w celu oceny aktywności enzymu;
Monitorowanie fermentacji mikrobiologicznej: Analizuj profil aminokwasów w bulionie fermentacyjnym drożdży i optymalizuj proces fermentacji.
Zastosowanie kryminalistyki i dochodzeń karnych
1. Rozwój ukrytych odcisków palców
Keton indenu to „złoty standard” odczynnika do kryminalistycznego wykrywania odcisków palców. Pot znajdujący się na odciskach palców zawiera aminokwasy (takie jak lizyna i seryna), które reagują z ninhydryną, tworząc fioletowy kompleks. Efekt obrazowania jest lepszy niż tradycyjna fumigacja jodem.
Proces operacyjny:
Natryskiwać 0,2% roztwór ninhydryny w etanolu na powierzchnię próbki;
Ogrzewanie w temperaturze 60 stopni przez 10 minut przyspiesza reakcję;
Fioletowe linie odcisków palców są wyraźnie widoczne i można je przechowywać przez kilka miesięcy.
Sprawa: W sprawie włamania z 2023 r. policji udało się rozwiązać sprawę, pobierając odciski palców podejrzanego z klamki drzwi za pomocą technologii obrazowania ninhydrynowego.
2. Identyfikacja aktywności jaj Schistosoma
Jaja schistosomy zawierają dehydrogenazę bursztynianową, która ma wysoką aktywność i może katalizować redukcję indenonu w celu wytworzenia fioletowych produktów; Martwe jaja nie mają aktywności enzymatycznej i mają żółty kolor. Metodę tę stosuje się do oceny efektu terapeutycznego schistosomatozy:
Przed obróbką: współczynnik oddawania barw żywych jaj jest większy niż 80%;
Jeśli po zabiegu współczynnik oddawania barw żywych jaj jest mniejszy niż 10%, oznacza to, że lek jest skuteczny.
Zastosowania w dziedzinie nauk rolniczych
1. Badania nad wykorzystaniem glebowych mikrobiologicznych źródeł węgla
Keton indenu może śledzić wchłanianie znakowanych substratów przez mikroorganizmy. Na przykład:
Dodaj do gleby mocznik znakowany ¹ ³ C;
Ekstrahuj białka drobnoustrojów i uwalniaj węgiel karboksylowy za pomocą ninhydryny;
Ocenić ilościowo proporcję węgla mocznika wchodzącego do biomasy drobnoustrojów, mierząc stosunek ¹ ³ C/¹ ² C za pomocą izotopowego spektrometru mas.
Znaczenie badawcze: Odkrycie mechanizmu wiązania węgla przez bakterie utleniające amoniak (takie jak Nitrosomonas) i optymalizacja strategii stosowania nawozów azotowych.
2. Analiza metabolizmu aminokwasów roślinnych
Keton indenowy w połączeniu z chromatografią bibułową (PC) umożliwia szybką analizę składu aminokwasów w tkankach roślinnych. Na przykład:
Ekstrakcja wolnych aminokwasów z liści ryżu;
Nasmaruj na bibule filtracyjnej, używając wody z kwasem n-butanolooctowym (4:1:1) jako środka wywołującego;
Rozpylić roztwór ninhydryny, podgrzać w celu wywołania koloru, obliczyć wartość Rf i określić rodzaj aminokwasu.
Scenariusz zastosowania: Badanie odmian odpornych na stres (takich jak ryż tolerujący sól) i badanie roli aminokwasów w reakcji na stres.
Zastosowania w materiałoznawstwie i testach przemysłowych
1. Odczynniki barwne do chromatografii cienkowarstwowej (TLC).
Indeneketon jest uniwersalnym odczynnikiem barwnym do wykrywania TLC związków aminowych
Zakres detekcji: aminy pierwszorzędowe, aminy drugorzędowe, aminokwasy, estry aminokwasów;
Punkty operacyjne: Po spryskaniu wywoływacza koloru podgrzej go w temperaturze 105 stopni przez 5 minut, a fioletowe plamy będą wyraźnie widoczne;
Czułość: Potrafi wykryć substancje aminowe na poziomie nanogramów.
Przypadek: W syntezie leków czystość półproduktów monitoruje się metodą TLC z ninhydryną, aby zapewnić selektywność reakcji.
2. Oznaczanie zawartości amin na powierzchni materiałów polimerowych
Keton indenowy może ilościowo analizować wolne grupy aminowe na powierzchni polimerów, takich jak chitozan i polilizyna
Zanurz materiał w roztworze ketonu indenu, podgrzej, zareaguj i zmierz absorbancję;
Obliczyć zawartość aminokwasów za pomocą krzywej standardowej i ocenić efekt modyfikacji materiału.
Znaczenie badawcze: Kierowanie projektowaniem funkcjonalnym materiałów biomedycznych, takich jak rusztowania inżynierii tkankowej.
Metoda syntezyhydrat ninhydryny, droga reakcji jest następująca:
Etap S1 obejmuje w szczególności następujące operacje: rozpuścić dihydroindeno-1,3-diketon w etanolu, dodać roztwór kwasu siarkowego, wrzucić roztwór azotynu sodu, kontrolować temperaturę reakcji na poziomie 15-20 stopni, przetestować punkt końcowy reakcji za pomocą bibuły testowej ze skrobi jodkiem potasu i otrzymać drobny proszek 2-nitrozo-1H-indeno-1,3(2H)-dion. Udział masowy roztworu kwasu siarkowego wynosi 50-60%, a udział masowy roztworu azotynu sodu wynosi 25-30%. Punktem końcowym reakcji badanym przy użyciu papierka testowego na skrobię z jodkiem potasu jest to, że papier testowy na skrobię z jodkiem potasu nie zabarwia się.
Etap S2 obejmuje w szczególności następujące operacje: 2-nitrozo-1H-indeno-1,3(2H)-dion podmienia się formaldehydem w obecności kwasu chlorowodorowego, otrzymując indeno-1,2,3trion w temperaturze 15-20°C. Udział masowy kwasu solnego wynosi 25–30%, a udział masowy formaldehydu 35–37%.
Etap S3 obejmuje w szczególności następujące operacje: dodanie 9-1,2,3 trionu do roztworu ekstrakcyjnego, wytrącenie osadu i suszenie osadu pod zmniejszonym ciśnieniem w temperaturze 50-60 stopni w celu otrzymania zredukowanego 9-1 trionu; Roztwór ekstrakcyjny jest roztworem składającym się z siarczynu sodu o niskiej zawartości i 35–37% wag. przemysłowego formaldehydu w stosunku masowym 1:1.
Etap S4 obejmuje w szczególności następujące operacje: utlenianie zredukowanej ninhydryny w roztworze kwasu azotowego w temperaturze 60 ~ 80 stopni w celu otrzymania surowej ninhydryny, rekrystalizację surowej ninhydryny i wody w stosunku masowym 1:5, suszenie otrzymanej substancji stałej chlorkiem wapnia, suszenie próżniowe w temperaturze 45 ~ 50 stopni w celu otrzymania uwodnionej ninhydryny.
Charakterystyczna reakcja:
Ninhydryna jest odczynnikiem stosowanym do wykrywania amoniaku oraz amin pierwszo- i drugorzędowych. Podczas reakcji z tymi wolnymi aminami może powstać ciemnoniebieska lub fioletowa substancja, zwana fioletem Ruhemanna. Jest często używany do wykrywania odcisków palców. Dzieje się tak za sprawą reszt lizyny zawartych w białkach i peptydach zrzucanych z powierzchni odcisków palców, a znajdująca się na nich amina pierwszorzędowa jest wykrywana przez ninhydrynę. W temperaturze pokojowej jest białą substancją stałą, rozpuszczalną w etanolu i acetonie. Ninhydrynę można uważać za hydrat dihydroinden-1,2,3-trinonu.
Reaktywność:
Atom węgla grupy karbonylowej jest częściowo naładowany dodatnio. Jeśli połączona z nią sąsiednia grupa ma zdolność przyciągania elektronów (np. rodnik karbonylowy), dodatni ładunek węgla karbonylowego zostanie jeszcze bardziej wzmocniony. Dlatego centralny atom węgla związków 1,2,3-trichonylowych jest bardziej elektrofilowy niż proste ketony. Dlatego indan-1,2,3-trion łatwo reaguje z nukleofilami, takimi jak woda. Jednakże w przypadku większości związków karbonylowych postać karbonylu jest bardziej stabilna niż postać produktów wiążących wodę. Powodem, dla którego ninhydryna może tworzyć stabilny hydrat centralnego atomu węgla, jest destabilizacja sąsiedniej grupy karbonylowej.
Należy zauważyć, że aby wytworzyć chromofor ninhydryny, należy skondensować aminę z jedną cząsteczkąhydrat ninhydrynydo produkcji zasady Schiffa. Przez ten etap mogą przejść tylko amoniak i amina pierwszorzędowa. Do przeniesienia zasady Schiffa muszą być stosowane protony, więc jeśli węgiel sąsiadujący z aminą jest trzeciorzędowym atomem węgla, nie można go wykryć jako produkt. Reakcja ninhydryny z aminą drugorzędową spowoduje wytworzenie soli iminowej ([R1R2C=NR3R4]+), a sól iminowa również ma kolor, zazwyczaj pomarańczowy.
Często zadawane pytania
Jaki jest hydrat ninhydryny?
Ninhydryna należy do klasy indanonów, czyli indan-1,3-dion zawierający dwa dodatkowe podstawniki hydroksylowe w pozycji 2. Pełni rolę wskaźnika koloru i ludzkiego metabolitu. Wchodzi w skład indanonów, hydratu ketonu, beta-diketonu i ketonu aromatycznego.2,2-Dihydroksy-1H-indeno-1,3-(2H)-dion.
Popularne Tagi: hydrat ninhydryny cas 485-47-2, dostawcy, producenci, fabryki, hurtownia, zakup, cena, luzem, na sprzedaż